人類原巨核細胞型白血病細胞UT-7細胞（提供STR鑒定報告）

平臺編號:zl-057214

細胞信息:UT-7細胞

產(chǎn)品規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

注意事項:僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準）

（1）細胞描述：該細胞于1988年建系；源于一名64歲患有急性粒細胞白血病（AMLM7）的男性的骨髓；對多種細胞因子有反應。在本庫通過STR鑒定結果正確，其STR鑒定結果如下：Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12；D13S317：8；D16S539：10，12；D18S51：14，17；D19S433：14，14.2；D21S11：31.2；D2S1338：18，23；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：8；D8S1179：11，15；FGA：23；TH01：6，9；TPOX：10；vWA：14，18，19；

（2）規(guī)格：T25方瓶或1ml凍存管

（3）細胞數(shù)量：1×10^6

（4）組織來源：人類原巨核細胞型白血病

（5）生長方式：懸浮生長

（6）細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

（7）培養(yǎng)液：RPMI-1640+10%FBS+1%P/S

（8）培養(yǎng)條件：37℃，5%CO2

（9）運輸方式：常溫運輸（T25方瓶）或干冰運輸（凍存管）

細胞處理：

1）凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存:收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

下面T25瓶為例；

1.細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.

2.1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞，按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3.將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

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